Application Note QPix 460自動微生物コロニーピッカーシステムで、カスタマイズ可能なプレーティングパターンを活用し、
サンプルハンドリングの柔軟性を向上

はじめに

寒天充填QTrayは、細菌コロニーの大規模培養やスクリーニングに使用されます。48ウェルの仕切り板を追加することで、複数の細菌サンプルを同じQTray上で別々に培養することができます（図1左）。通常、QPix 460へのプレーティングは、仕切り付きQTrayを使用して簡単に行うことができます。しかし、仕切りのないQTrayでも複数の細菌サンプルを培養することは可能ですが、交差汚染に関する懸念を克服する必要があります。このノートでは、サンプル間の交差汚染の可能性を最小限に抑えながら、QPix™ 460のカスタマイズプレーティングを使用して、仕切りなしのQTraysにプレーティングする方法を紹介します。

QPix 460自動微生物コロニーピッカーは、寒天を充填したQTrayにサンプルをプレーティングする機能を備えています。96サンプルを30分でプレーティングできます。QPix 460のデフォルトのプレーティングパターンは、仕切り付きの寒天入りQTrayのプレーティング用に設計されています。しかし、QPix 460ソフトウェアのPlating Pattern Editorプロセスにより、ユーザーはカスタムプレーティングパターンを柔軟に作成できます。これにより、仕切りのない寒天入りQTrayにプレーティングする際に、汚染を防ぐために十分なサンプル間隔を確保できる、より小さなプレーティングパターンを作成することが可能になります。

カスタムプレーティングパターンの作成

Plating Pattern Editorは、QPix 460ソフトウェアのPlating Processesの下にあります（図2）。Plating Editorウィンドウで、カスタムプレーティングパターンを作成し、追加することができます（図3）。

QTrayへの大腸菌プレーティング

パーシャルスパイラルプレーティングパターン（図4B）を作成した後、QPix 460のプレーティングプロセスとスプレッディングヘッドおよびピンを使用して、様々な濃度で希釈した大腸菌をLB寒天培地QTray（仕切りなし）にプレーティングしました。QPix 460は、各大腸菌サンプルを40µlずつピペッティングし、部分スパイラルプレーティングパターンを使用するようにプログラムされていました。

プレーティング後、QTrayを37℃で一晩培養した。翌日、QPix 460でQTray全体を白色光イメージングした（図5Bおよび6B）。

黄色の枠で囲った部分の拡大図を図6に示す。

結論

部分的なスパイラルプレーティングパターンを用いると、各サンプル間に十分なスペースがあるため、サンプル間のコロニーの増殖は観察されず、サンプルは分離されたままである。このことから、QPix 460は、仕切りのあるQTrayだけでなく、仕切りのないQTrayにもクロスコンタミネーションなしに複数のサンプルをプレーティングできることがわかります。同じ部分プレーティングパターン法は、Nunc™ OmniTrays™にも適応できます。