・イメージングとインキュベーターのプレートを輸送し、不連続タイムラプスを使用して測定
・蛍光染色または非標識細胞を使用
・薬剤スクリーニング用の96ウェルマイクロプレートへのスケールアップ
・自動的にイメージングされ、保存された生細胞タイムラプスのムービーを作成・エクスポート
セル遊走アッセイ 蛍光染色または非標識細胞を使用
自動イメージングを使用した細胞遊走アッセイで、経時的に遊走する生細胞を測定する
創傷治癒やがん細胞の転移など、様々な生理的活動のメカニズムを解明するために、細胞の移動や遊走をin vitroで測定することが多いです。細胞遊走アッセイは、生細胞タイムラプスイメージングを用いて、制御された環境で実施することができます。マイクロプレート内で増殖しているコンフルエントな細胞単層に、手作業で傷をつけるか、均一で再現性のある無細胞領域を提供する特殊なマイクロプレートを利用して「傷」を作ります。透過光またはライブセル対応の蛍光を用いて、細胞の増殖、遊走、拡散をモニターします。これらのミディアムからハイスループットのアッセイは、阻害化合物または刺激化合物で処理した細胞間の遊走を比較するために使用することができます。
不連続タイムラプス画像の取得
透過光または蛍光画像を用いた細胞領域の解析
オリスプロアッセイによる細胞遊走解析
Fluoroblokによる細胞遊走の評価
タイムラプス画像からの動画作成
細胞遊走の測定
対物レンズによるセル遊走の定量化
測定値のソート
測定値のトレンドの可視化
プレート全体の概観
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不連続タイムラプス画像の取得
MetaXpress®ソフトウェアでは、さまざまな間隔で行われたデータ取得を1つのタイムラプス実験に簡単に追加することができ、視覚化と解析が容易になります。
ImageXpress Microで不連続タイムラプスビデオを取得 > -
透過光または蛍光画像を
用いた細胞領域の解析
このアッセイでは、細胞の増殖、遊走、拡散のすべてが、傷がふさがる細胞の能力に寄与します。透過光または生細胞対応蛍光を用いた自動タイムラプスイメージングは、「治癒」の進行を測定する手段を提供します。各時点の画像は、ハイコンテント画像解析ソフトウエアで対物レンズ解析が可能であり、データを時系列としてプロットしたり、特異性のある時点で個別に評価することができます。
シンプルなスクラッチアッセイとタイムラプスイメージングによる細胞遊走の測定 > -
オリスプロアッセイによる
セル遊走解析
このアッセイでは、無毒性の生体適合性ゲルを用いてウェル中央に無細胞ゾーンを形成します。セル播種後、生体適合性ゲルが溶解し、細胞がウェル中央の検出ゾーンに遊走できるようになります。MiniMaxサイトメーターで取得した画像では、検出ゾーンに対応する関心領域を指定し、細胞の遊走レベル（細胞で覆われた面積）を解析します。
SpectraMax MiniMaxサイトメーターを用いたOris Proアッセイによるセル遊走解析 > -
Fluoroblokによる
細胞遊走の評価
SpectraMax i3xリーダーおよびMiniMaxサイトメーターをFluoroBlok細胞培養インサートとともに使用することで、高画質画像から細胞を直接カウントし、細胞の遊走を経時的に測定することができます。SoftMax Proソフトウェアを使用すると、簡単なポイント＆クリックのユーザーインターフェースで、細胞数の解析を素早くセットアップできます。画像解析は、細胞染色レベルやバックグラウンド蛍光の影響を受けるロー蛍光と比較して、正確なデータを提供します。SoftMax Proソフトウェアの画像取得・解析機能と96ウェルFluoroBlokフォーマットを併用することで、研究者は豊富な細胞遊走データを迅速に評価し、がんをはじめとする生物学の様々な分野の研究を推進することができます。
SpectraMax MiniMaxサイトメーターを用いたFluoroBlokインサートによる細胞遊走の評価 > -
タイムラプス画像からの
動画作成
MetaXpressを数回クリックするだけで、生画像、重ね合わせた波長、または解析マスクから動画をレンダリングすることができます。
ビデオを見る >
シンプルなスクラッチアッセイとタイムラプス生細胞イメージングを用いた細胞遊走測定 > -
細胞遊走の測定
細胞の遊走、すなわち細胞の移動は、創傷治癒、免疫学、胚発生、および癌転移のような不規則な細胞事象に関連しています。細胞遊走アッセイは、制御された環境で細胞の運動性を測定するために用いられ、「スクラッチ」アッセイと、あらかじめ「傷」が形成されたマイクロプレートを利用したアッセイの両方が、この目的のために頻繁に利用されています。96ウェルおよび384ウェルのマイクロプレートでアッセイを行うことで、化学療法化合物や創傷治癒を早める薬剤など、細胞の遊走能力に影響を及ぼす可能性のある複数の化合物を、適切な複製を用いた1回の制御された実験で試験することができます。
生細胞の不連続タイムラプスイメージングを用いて細胞遊走を測定する > -
対物レンズによる
細胞遊走の定量化
細胞遊走は、正常な発生、免疫機能、創傷治癒において重要なプロセスです。異常な細胞遊走は、心血管疾患やがんなどの病態の特徴です。CloneSelect Imagerシステムは、細胞間相互作用の研究だけでなく、細胞遊走に対する治療薬候補や細胞培養マトリックスのin vitro効果を明らかにします。CloneSelect Imagerの遊走アプリケーションソフトウェアにより、対物レンズによる細胞遊走の測定が可能になります。
CloneSelect Imagerシステムによる細胞遊走の対物レンズ定量化 > -
値をソートして
目的のデータを表示
表解析フォーマットは、ヒートマップで必要とされるような個々のウェル内を調べることなく、関心のある測定の結果を分析するために使用することができます。また、表解析形式では、各列の値に独立してヒートマップを適用することができます。
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測定値の傾向を可視化
散布図分析ウェルフォーマットにより、選択したウェル間の測定値の傾向を特定することができます。この例では、Cytochalasin Dで処理したセルは、未処理のコントロールほど完全に無細胞ゾーンに遊走しなかったことがわかります。
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プレート全体の概観
96ウェルフォーマットのオリスプロ細胞遊走アッセイの低倍率画像（4倍）のサムネイルモンタージュは、細胞遊走を測定するための一貫した無細胞ゾーンの利点を示しています。