幹細胞研究 複雑なアッセイや3D人工多能性幹細胞(iPSC)由来細胞モデルの幹細胞イメージングと解析ワークフローのオートメーション
幹細胞研究とは
幹細胞は、疾患プロセスに関連した標的や経路を研究する新たな機会を研究者に提供します。幹細胞は、新薬の標的を同定し確認するためのより現実的なモデルを提供します。薬理学的・毒物学的データを早期に作成し、より強力に臨床に応用することができます。さらに、幹細胞を医薬品開発に応用することは、個別化医療への新たな道を開くと同時に、動物実験を減らす、あるいは動物実験を代替できる可能性さえあります。
人工多能性幹細胞由来(iPSC由来)細胞は、研究者がプライマリー細胞を研究することを可能にします。
幹細胞研究の利点
バイオ医薬品業界は、一次スクリーニングや二次スクリーニングに、より多くの細胞ベースのアッセイを適応させ続けています。これらの生物的妥当性が高まり、情報価値が増大しているからです。この進化の一環として、不死化された安定した細胞株から、プライマリー細胞や幹細胞への移行が求められています。幹細胞には、細胞株よりも臨床的な関連性が高く、大量に入手可能であり、初代細胞よりもアッセイの再現性が高いという利点があります。そのため、創薬の初期段階におけるスクリーニングツールとして、また新規化合物の潜在的な毒性作用を評価する方策として、幹細胞アッセイの自動化とに大きな関心が寄せられています。
幹細胞を用いたアッセイのワークフローは、他の細胞ベースのアッセイと似ていますが、決定的な違いがあります。幹細胞アッセイでは、未分化細胞から開始する必要があるため、あるいはアッセイが分化プロセスを研究するものであるため、多くのケースで分化が関与します。複数の細胞系列が存在する場合、あるいは成熟細胞と未分化細胞の両方が存在する場合、細胞の種類と数をモニターすることが重要になります。従って、複数の細胞型からの複数の読み出しが必要となるため、データ解析と可視化の要件はより複雑になります。
ハイコンテントスクリーニング技術とツールによる幹細胞イメージング
複雑なアッセイと3D iPSC由来細胞モデルは、組織生物学と細胞相互作用をよりよく表現するため、多くの毒性アッセイや薬剤スクリーニングアッセイに適しています。そのため3D培養を用いた、よりスループットの高い定量的アッセイの開発が活発に研究されています。複雑な3D画像取得と解析ワークフローは、これらのアッセイをスクリーニング用にスケールアップすることを困難にしています。
ImageXpress®マイクロハイコンテンツイメージングシステムとMetaXpress®3D解析モジュールを組み合わせることで、3D構造の定量化と可視化をよりシンプルなワークフローで実施できます。
iCell肝細胞由来の3Dスフェロイド肝微小組織を用いた肝毒性アッセイの例:
(A) iCell肝細胞を2Dフォーマットで7日間培養した後、3D培養を行いました。スフェロイド形成後、肝微小組織を化合物で72時間処理し、2時間染色して画像化しました。Z平面はImageXpress Micro Confocalシステムを用いて取得しました。
(B)取得されたZプレーン画像は、2Dおよび3D画像セグメンテーションのセット作成に使用され、3D培養の主要な表現型の特徴を定量化するために解析されました。
ISSCR2021で発表された幹細胞科学の知見とブレークスルー
今年のISSCR年次総会では、世界中からリーダーが集まり、新技術について議論し、研究上の洞察を共有しました。テーマは幹細胞科学と再生医療における新たなブレークスルーです。参加者は、複雑な生物学的システムから重要なデータを取得し、ラボのコストを削減し、研究の限界を押し広げる方法を学びました。
会期中に開催されたイノベーション・ショーケースやポスター発表に参加できなかった方も、ご安心ください。モレキュラーデバイスでは、すべてのショーケースの概要とポスターセッションをサイトでご覧いただけます。
幹細胞研究を支援する製品・サービス
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CellXpress.ai
自動細胞培養システム機械学習とデータに裏付けられた自動処理による次世代細胞培養システム
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ImageXpress Confocal HT.ai
ハイコンテントイメージングシステム7波長の高輝度レーザー光源と機械学習機能を備えた、
拡張可能でハイスループットなハイコンテントスクリーニングソリューション -
IN Carta
画像解析ソフトウェア複雑な生物学的画像やデータセットから、ロバストで定量的な結果を提供します。
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FLIPR Penta
ハイスループットセルベーススクリーニングシステムリード化合物の同定および化合物の安全性評価を目的とした
ハイスループットカイネティックスクリーニングに理想的なシステム -
ImageXpress Pico
自動細胞イメージングシステム高品質な細胞画像の取得と解析を数分で行えるデジタル顕微鏡システム
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SpectraMax iD3/iD5
マルチモードマイクロプレートリーダー大型タッチスクリーンを備えた高感度マイクロプレートリーダー
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ClonePix 2
自動動物細胞コロニーピッキングシステムモノクローナル抗体やバイオ医薬品を生産する細胞株樹立ワークフローの自動化ソリューション
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ImageXpress Micro 4
ハイコンテント イメージングシステム設定可能なハイスループットのワイドフィールドイメージングソリューション
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ImageXpress Micro Confocal
ハイコンテントイメージングシステム1週間に100万ウェルを超えるイメージングが可能な、ユニークな共焦点イメージングソリューション
幹細胞アプリケーションと、データをユニークな
生物学的洞察に変換するツール
幹細胞のワークフローでは、初期増殖から幹細胞分化、品質管理、そして最終的には治療研究や創薬研究のための予測アッセイまで、すべての段階をモニターする様々な複雑なアッセイが要求されます。当社の一連のハードウェアとソフトウェア・ソリューションは、ワークフローの多くの段階において、幹細胞の自動解析を可能にします。私たちは、幹細胞アッセイのワークフローをさらに凝縮し、自動化するための新しい技術を開発し続けています。
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3D細胞モデル
3D細胞培養モデルは、構造、細胞組織、細胞-細胞間および細胞-マトリックス間の相互作用、生理学的により関連した拡散特性など、ヒト組織の側面を忠実に再現できるという利点があります。3D細胞アッセイの活用は、2D細胞培養と全動物モデルとのトランスレーショナルなギャップを超えて、研究やスクリーニング・キャンペーンに付加価値をもたらします。生体内環境の重要なパラメーターを再現することで、3Dモデルは、試験管内での幹細胞や発育中の組織の挙動についてユニークな洞察を提供することができます。
Organ-on-a-chip(臓器チップ) >
オルガノイド >
スフェロイド > -
心筋細胞
心筋細胞に分化した幹細胞は、薬剤の潜在的な毒性作用を早期にスクリーニングするために使用され、その結果、心臓毒性により臨床試験で失敗する薬剤の開発投資を避けるのに役立ちます。
ポスター:ヒトiPSC由来心筋細胞における化合物誘発性催不整脈作用のマルチパラメトリック評価 >
ImageXpressハイコンテントスクリーニングシステムによる心毒性アッセイ >
幹細胞由来心筋細胞を用いたハイスループット心毒性アッセイ >
iPSC由来細胞モデルを用いた化合物試験のためのマルチプレックス自動イメージングアッセイ >
論文:器官型ヒトiPSC由来モデルを用いた環境化学物質のin vitro心毒性評価 > -
疾患モデル
疾患モデル系は、単純な2次元細胞培養から複雑なモデル生物まで、その複雑さと規模は多岐にわたります。モデル生物はin vivoの状況を提供するが、コストがかかることが多く、ヒトの生物製剤を表現できないことがあります。一方、従来の2次元細胞培養システムは長年使用されてきましたが、生体組織に見られる複雑な3次元構造や細胞間相互作用を表現するには限界がありました。その結果、3次元細胞培養は、疾患モデル化のための魅力的なモデル系として浮上してきました。
疾患モデルを見る > -
創薬と医薬品開発
1つの医薬品がゴールラインに到達するごとに、別の9つの医薬品は成功しません。この憂慮すべき失敗率は、複雑なヒトの生物学を忠実に模倣していない2次元細胞培養に依存していることに起因しています。
創薬と医薬品開発を見る > -
造血
造血前駆細胞(造血幹細胞)に分化した幹細胞は、細胞治療と医薬品開発の双方にとって重要です。白血病や免疫系疾患など、さまざまな血液疾患の研究に利用できます。
リンパ系や骨髄系の細胞系譜が発生する過程で、造血幹細胞(HSC)は造血前駆細胞に分化します。造血幹細胞の増殖と分化をモニタリングすることは、造血の研究や造血幹細胞を用いた治療法の開発にとって重要です。
ポスター:造血幹細胞分化および造血毒性解析のためのハイスループット マルチプレックスアッセイ >
ポスター:新規ハイコンテント幹細胞ベースアッセイによるスクリーニング > -
肝細胞
肝細胞に分化した幹細胞は、薬剤候補による肝毒性を予測するのに利用できます。薬剤による肝毒性は、肝障害や急性肝不全の重要な原因です。従って、安全性と有効性を試験するための予測性の高いアッセイは、医薬品開発を改善するために極めて重要です。ここでは、ImageXpress Microシステムを利用したマルチパラメトリック肝毒性アッセイの開発を実証します。MetaXpress®ハイコンテント画像取得・解析ソフトウェアのカスタムモジュールを用いて、各ウェルまたは細胞から複数の化合物による細胞応答が得られます。
iPSC由来肝細胞を用いたマルチプレックスハイコンテント肝毒性アッセイ >
ポスター:iCell®肝細胞を用いたマルチプレックス肝毒性アッセイ > -
ヒトiPSC由来3D神経スフェロイド(Stemonix microBrain 3D)
より効果的で安全な医薬品の開発を加速するために、創薬や毒性スクリーニングのための、より複雑で生物学的関連性が高く、予測可能な細胞ベースアッセイの必要性が高まっています。ヒトiPSC由来の神経3D共培養(StemoniX® microBrain® 3Dプラットフォーム)は、よりネイティブなヒト皮質脳組織の構成に近いハイスループットスクリーニングプラットフォームとして開発されました。3D神経スフェロイドは、シナプスに富む神経ネットワークを封じ込め、自発的、同期的、容易に検出可能なカルシウムオシレーションを示す高機能神経回路を形成します。
神経活性化合物効果の表現型的特徴づけ >
複合事象解析によるヒトiPSC由来神経スフェロイド3次元培養における化合物影響の神経毒性プロファイリング >
iPSC由来3次元神経共培養における神経毒性および神経活性化合物効果の機能評価 >
ウェビナー:創薬における3D神経スフェロイドの実装 >
ポスター:iPSC細胞由来神経3次元細胞モデルを用いた神経毒性評価のためのマルチプレックス自動アッセイ > -
イメージングサイトメトリーが複雑な細胞ベースアッセイを可能にする
一般的な細胞健全性アッセイと特異性の測定を組み合わせることで、毒性結果の質に対する信頼性が高まります。SpectraMax® MiniMax™ 300イメージングサイトメーターは、マイクロプレートリーダーアッセイをイメージングサイトメトリーで補完する直感的なプラットフォームであり、イメージングの専門家でなくても、より生物学の関連性の高いデータを得ることができます。ここでは、イメージングサイトメーターで実施したiPSC由来細胞を用いた生存率および毒性アッセイの結果を紹介します。
人工多能性幹細胞由来細胞を用いた毒性アッセイ >
ウェビナー:イメージングサイトメトリーによる新しいプレートリーダープラットフォームを用いた細胞ベースアッセイ >
ポスター:新規イメージングサイトメトリーシステムと対物レンズ認識ソフトウェアを用いた複雑な細胞ベースアッセイ > -
生細胞タイムラプス
イメージング生細胞タイムラプスイメージングは、特異性期間にわたって生細胞の反応をモニターする能力を提供し、研究者にアッセイ開発における重要な利点を提供します。日常的な細胞ベーススクリーニングでは、タイムコースの結果から、エンドポイントアッセイを読み取る適切な時期を決定することができます。ここでは、ハイコンテントタイムラプスイメージャーを使用して、細胞の健康カイネティクスの特徴を明らかにし、iPSC由来ニューロンの細胞増殖や死滅をモニターする方法を示します。
生細胞アッセイ開発を強化するインテリジェントタイムラプスイメージング >
ウェビナー:細胞分裂のタイミング制御を調べる生細胞イメージング > -
神経幹細胞の拡大および分化
医薬品開発の初期段階において、神経細胞をスクリーニング・ツールとして用いることに大きな関心が寄せられています。しかし、神経幹細胞の膨張と分化をモニターするアッセイは複雑であり、手作業による解析は手間がかかり、不正確なこともあります。ここでは、幹細胞の膨張を自動的に評価し、分化の程度を定量化するための、合理的なハイコンテントイメージングと解析のワークフローを示します。
ハイコンテントイメージャーを用いた神経幹細胞の膨張と分化のモニタリング
ポスター:新規ハイコンテント幹細胞ベースアッセイによるスクリーニング >
ポスター:神経幹細胞の膨張と分化のハイコンテント解析 > -
神経細胞、神経突起伸長
ニューロンへと分化した幹細胞は、アルツハイマー病、統合失調症、不安神経症などの中枢神経系(CNS)疾患を研究するための創薬にしばしば用いられます。これらのニューロンはまた、薬物の安全性と有効性を予測するための毒物学的アッセイにも使用できます。
ImageXpress Picoシステムを用いた神経突起伸長に対する化合物特異的効果の同定 >
iPSCを用いた神経突起伸長アッセイによる神経毒性と神経細胞発達の評価 >
ヒトipsc由来神経細胞培養を用いた3Dマトリックス中での神経細胞発生の形態学的特性評価のためのハイコンテントアッセイ > -
神経毒性、神経細胞毒性
ヒト由来のiPSCを用いたハイコンテントイメージャーは、医薬品候補物質や環境汚染物質の神経栄養、神経保護、神経毒性効果を調べるために応用できます。このノートでは、iPSCとMolecular Devicesのインストゥルメンテーションおよびソフトウェアを用いた自動エンドポイントアッセイおよびライブセルアッセイによる神経細胞毒性スクリーニングについて説明します。
iPSC由来ヒト神経細胞を用いた神経細胞毒性のハイコンテントスクリーニング >
ポスター:人工多能性幹細胞由来神経3次元細胞モデルを用いた神経毒性評価のためのマルチプレックス自動アッセイ法 >
ウェビナー:ヒトiPS細胞由来ニューロン:神経毒性のハイコンテントスクリーニングのための創薬応用のための新しい生理学的モデル >
ウェビナー:ヒトiPSC由来神経細胞のハイコンテント表現型特性解析へのAIベースのアプローチ > -
オルガノイド
オルガノイドは3次元(3D)多細胞マイクロティッシュであり、ヒト臓器の複雑な構造と機能を忠実に模倣するように設計されています。オルガノイドは通常、高次の自己集合を示す細胞の共培養から成り、従来の2次元細胞培養と比較して、生体内の複雑な細胞反応や相互作用をよりよく表現することができます。
脳オルガノイド >
乳がん腫瘍 >
心臓オルガノイド >
大腸がん(CRC)オルガノイド >
腸管オルガノイド >
患者由来オルガノイド(腫瘍) >
肺オルガノイド > -
表現型スクリーニング
hERG遮断薬、ß-アドレナリン作動薬、環境毒素など、iPSC由来心筋細胞における化合物のプロファイルを開発するために、イメージングとカルシウムオシレーション解析の両方を使用する方法を学びます。 iPSC由来神経細胞培養物を、神経調節物質と環境毒素で評価しました。
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プラスミド生産
プラスミドは、染色体DNAとは独立して機能する小さな環状DNA分子である。分子生物学の中心的存在であり、遺伝子の研究、操作、生産を可能にし、分子クローニング、遺伝子治療、ワクチン開発において重要な役割を果たしています。
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毒物学
毒物学は、天然または人工の化学物質が生体に及ぼす悪影響を研究する学問である。環境中や使用する製品に含まれる化学物質にさらされる機会が増えている今日、毒性学への関心が高まっています。
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