酵素結合免疫吸着測定法（ELISA）

サンプル内の抗原を定量的に検出するために使用する方法

ELISAプロトコルのワークフロー

通常のサンドイッチELISAプロトコルのワークフローには、複数の試薬添加、インキュベーション、洗浄ステップがあります。ここでは各ステップと、ELISAアッセイの実施に必要な機器と器具（マイクロプレートウォッシャー、吸光ELISAプレートリーダー、ソフトウェア）について紹介します。

• 捕捉抗体がウェルに結合

  捕捉抗体がELISAプレートのウェルに結合します。

• サンプルを添加

  サンプルをウェルに添加することで、サンプル中の抗原が捕捉抗体に結合します。

• マイクロプレートの洗浄

  マイクロプレートの洗浄により、未結合物は洗浄され、目的の抗原のみが残ります。

• 捕捉抗体がウェルに結合

  まず、捕捉抗体をマイクロプレートウェルの底に結合させます。

• 検出抗体を添加

  検出抗体を添加することで、酵素結合検出抗体が目的の抗原の第2の部位に結合します。

• マイクロプレートの洗浄

  マイクロプレートの洗浄により、結合していない抗体を洗浄し、目的の抗原に特異的な抗体のみを残します。

• 基質が変換

  基質添加により検出抗体上の酵素により基質が変換され、色が変化します。

• 測定

  マイクロプレートリーダーがプレートを読み取ることで、発色した反応生成物を検出し、光学濃度（OD）値を出力します。

• 抗原量の算出

  各サンプル中の抗原量が算出され、分析されます。

ELISAはセットアップが簡単な反面、アッセイ手順には時間と労力がかかります。ハイスループットなマイクロプレートベースアッセイワークフローのためのラボオートメーション・ワークフロー化は、離席時間の提供、スループットの向上、アッセイ手順の有効性と効率性、再現性の向上に役立ちます。

酵素結合免疫吸着測定法は、多くの研究室やバイオテクノロジー施設でよく使用されている分析技術です。重要なELISAアッセイおよびアプリケーションに関連するアプリケーションノート、研究および技術は次の通りです。